His标签蛋白纯化填料专为His-tag融合蛋白的纯化而设计，采用该产品可快速从细胞破碎液/培养液中捕获His标签融合蛋白。依据表达系统的不同，可选择具有不同整合配基种类的产品：IDA、NTA以及Plus，其中，IDA和NTA适用于纯化大肠杆菌胞内表达的His蛋白，Plus适用于纯化昆虫细胞、哺乳动物细胞等真核细胞胞外表达的His蛋白。
产品说明
His标签蛋白纯化填料专为His-tag融合蛋白的纯化而设计，采用该产品可快速从细胞破碎液/培养液中捕获His标签融合蛋白。依据表达系统的不同，可选择具有不同整合配基种类的产品：IDA、NTA以及Plus，其中，IDA和NTA适用于纯化大肠杆菌胞内表达的His蛋白，Plus适用于纯化昆虫细胞、哺乳动物细胞等真核细胞胞外表达的His蛋白。
His标签蛋白纯化填料(GP-IDA)以超大孔聚丙烯酸酯微球作为基质，以亚氨基二乙酸(IDA)作为螯合配基，常规整合Ni2+。该产品传质阻力低，适用于从大肠杆菌破碎液上清等粘度较大的原液中捕获His蛋白。
His标签蛋白纯化填料(CP-NTA)以大孔聚丙烯酸酯微球作为基质，以次氨基三乙酸(NTA)作为鳌合配基，可以耐受蛋白溶液中添加的低浓度B-疏基乙醇或二硫苏糖醇(DTT)等还原剂组分。
His标签蛋白纯化填料 (HP-Plus) 以聚丙烯酸酯微球作为基质，采用博进特有的金属螯合配基(Plus)，即使在含有EDTA的溶液中Ni2+亦能稳定吸附而不脱落；同时该产品进行CIP清洗时不用重新挂Ni，可直接用NaOH溶液进行清洗。该产品能大幅节省样品前处理和填料后处理时间，尤其适用于昆虫细胞、哺乳动物细胞等真核细胞分泌表达的His标签蛋白的纯化。
产品特点
| 参数 | His标签蛋白纯化填料（GP-IDA） | His标签蛋白纯化填料（GP-NTA） | His标签蛋白纯化填料（HP-Plus） |
| 基质 | 超大孔聚丙烯酸酯硬胶 | 大孔聚丙烯酸酯硬胶 | 聚丙烯酸酯硬胶 |
| 配基 | IDA | NTA | Plus |
| 平均粒径 | 70 μm | 70 μm | 70 μm |
| 还原剂耐受性 | 不耐受 | β-Me≤100 mMDTT≤5mM | EDTA≤50mM |
| 动态载量 | ≥ 40 mg/ml | ≥ 30 mg/ml | ≥ 10 mg/ml |
| 流速上限 | 1000 cm/hr | 1000 cm/hr | 1000 cm/hr |
| 耐压上限 | 1 MPa | 1 MPa | 1 MPa |
| 保存 | 4-30 ℃（20% 乙醇） | 4-30 ℃（20% 乙醇） | 4-30 ℃（20% 乙醇） |
| 特点 | 蛋白载量大 | 金属离子脱落率低 | 可耐受高浓度还原剂 |
为了满足用户的不同纯化需求，博进生物亦可提供琼脂糖软胶基质的His标签蛋白纯化填料。针对His蛋白结合力和过渡金属离子选择性的不同，还可提供未螯合金属离子的IMAC产品，用户可以自行选择整合Cu2+, Zn2+、Co2+等过渡金属离子。
| 参数 | His标签蛋白纯化填料（NTA） | His标签蛋白纯化填料（IMAC） |
| 基质 | 琼脂糖软胶 | 琼脂糖软胶 |
| 配基 | NTA | IDA/NTA/Plus |
| 平均粒径 | 90 μm | 90 μm |
| 流速上限 | 500 cm/hr | 500 cm/hr |
| 耐压上限 | 0.3 MPa | 0.3 MPa |
| 保存 | 4-8 ℃（20% 乙醇） | 4-8 ℃（20% 乙醇） |
| 特点 | 金属离子脱落率低 | 可自由选择金属离子种类 |
应用实例
从大肠杆菌破碎液上清中纯化His融合蛋白
柱尺寸: 1.6cm ID x 2.5cm
缓冲液：缓冲液A: 20mM PB+0.15M NaCI, pH6.0 (wash1)；缓冲液B：缓冲液A+10mM咪唑(wash2)；缓冲液C：缓冲液A+100mM咪唑(elute)
流速：5ml/min
检测波长：280nm
样品：细胞粗提液520ml
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